De leur affectation à Toulouse à partir de 1954 et jusqu'aux années 70, l'utilisation de ces engins, seuls ou en unités multiples de deux ou trois locomotives, a eu lieu épisodiquement sur des trains de marchandises et messageries Toulouse - Avignon via la Transversale Sud.
Trois BB 300 (BB 327, 345 & 346) adaptées aux manœuvres (vitesse limitée à 75 km/h) ont été affectées en mars 1987 au dépôt d'Avignon afin d'être utilisées en manouvres dans le complexe ferroviaire de Fos sur Mer, entre le chantier de Coussoul et les différents faisceaux du site. La BB 345 fut réformée en novembre 1992 suite à un accident, tandis que les deux autres machines restèrent à l'inventaire jusqu'au 1er décembre 1997.